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PCR技術(shù)是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù),它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制,目前市場(chǎng)上常見(jiàn)的有:普通PCR儀、梯度PCR儀、原位PCR儀、熒光定量PCR儀(qPCR)以及數(shù)字PCR儀(dPCR)等。而使用多是梯度PCR儀和熒光定量PCR儀,生產(chǎn)PCR儀廠家也是不勝枚舉。
小編將就如何選購(gòu)一臺(tái)合適的梯度PCR儀作以下介紹,供大家參考。
精準(zhǔn)的溫度控制系統(tǒng)
對(duì)PCR儀來(lái)說(shuō),溫度控制指標(biāo)主要是指溫度的準(zhǔn)確性、均一性、以及升降溫速度。
溫度的準(zhǔn)確性:是指樣品孔溫度與設(shè)定溫度的一致性,它直接關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。由于PCR是一個(gè)幾何級(jí)數(shù)擴(kuò)增的過(guò)程,不論是變性、退火還是延伸都需要準(zhǔn)確控制溫度,對(duì)退火溫度而言溫控顯的尤為重要,有時(shí)1°甚0.5°的差異也能決定實(shí)驗(yàn)的成功與失敗,所謂差之毫厘,謬之千里。因而對(duì)PCR擴(kuò)增儀而言溫度控制就意味著質(zhì)量。
溫度的均一性:是指樣品孔間的溫度差異,它關(guān)系到在不同樣品孔進(jìn)行反應(yīng)結(jié)果的一致性。有用戶發(fā)現(xiàn)用同樣的樣品,同樣的PCR反應(yīng)程序,后的結(jié)果竟然差異非常明顯,或許就是因?yàn)椴煌恢玫臏囟炔痪鶆蛩?。同時(shí)位置邊緣效應(yīng)對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)可重復(fù)性影響非常明顯。
升降溫速率:更快的升降溫速度,可以縮短反應(yīng)進(jìn)行的時(shí)間,而且縮短了可能的非特異性結(jié)合、反應(yīng)的時(shí)間,能提高PCR反應(yīng)的特異性。2.2 儀器的功能性和人性化設(shè)計(jì),越友好的操作界面、完善的功能以及人性化的設(shè)計(jì)更能吸引用戶。(熱蓋、樣品座、軟件)
熱蓋:現(xiàn)在的PCR儀一般均配備熱蓋,熱蓋溫度設(shè)為105℃,使樣品管頂部的溫度達(dá)到105℃左右,蒸發(fā)的反應(yīng)液就不會(huì)產(chǎn)生凝集在管蓋上而改變反應(yīng)體積,這樣用戶就無(wú)需再向反應(yīng)管內(nèi)加石蠟油,直接減少后繼反應(yīng)的麻煩。
樣品座:PCR反應(yīng)多在0.2或者0.5的管子中進(jìn)行,多數(shù)PCR儀也配備了不同的可更換樣品槽適配不同的樣品管。
軟件:新的PCR儀都比較注重程序編寫(xiě)的簡(jiǎn)易性。大屏幕,顯示實(shí)時(shí)信息,倒計(jì)時(shí),記憶存儲(chǔ)多個(gè)程序、自動(dòng)斷電保護(hù)等都有助于實(shí)驗(yàn)室中的復(fù)雜環(huán)境使用。
隨著生物技術(shù)的發(fā)展,PCR儀已經(jīng)發(fā)展為實(shí)驗(yàn)室通用儀器,因此生產(chǎn)廠家也是如雨后春筍般層出不窮,光是比較參數(shù),就夠累了。況且PCR儀還是實(shí)驗(yàn)室中的老黃牛,幾乎24小時(shí)運(yùn)轉(zhuǎn),買(mǎi)臺(tái)可靠的儀器尤為重要。
建議在選購(gòu)PCR儀時(shí),除溫度、功能、人性化設(shè)計(jì)外,還需要注意價(jià)格、使用壽命、售后服務(wù)、機(jī)器噪音、品牌的度等。